Сверхслабые излучения в межклеточных взаимодействиях, 1981

деленной концентрацией клеток па покровные стекла (табл. 32). Формирование жизнеспособного монослоя в клеточной куль- туре ПАО наблюдается при концентрации 50 тыс./мл (42% пло- щади препарата занято клетками), а для культуры клеток Fl — 60 тыс./мл (46% площади занято клетками). С увеличением кон- центрации клеток происходит зарастание всей площади подложки. Максимальная концентрация клеток, образующая плотный монослой (100% площади препарата занято клетками): для ПАО — 100 тыс./мл, для Fl — 120 тыс./мл. При дальнейшем увеличении пороговой концентрации наблюдается образование сплошного слоя клеток с многослойными участками. Изучая зависимость проявления «зеркального» ЦПЭ от коли- чества клеток в монослое, одну из клеточных культур с плотным или разреженным монослоем (в зависимости от условия опыта) подвергали воздействию экстремального агента, другая служила детектором излучения, отражающего цитопатические изменения, возникающие в пораженных клетках — «зеркальная» культура. Экстремальным агентом применяли двухлористую ртуть в кон- центрации 5 мкг/мл и ультрафиолетовое облучение (экспозиция 40—45 с; лампа БУВ-30, расстояние 0,5 м). Токсическая доза сулемы вследствие блокады дыхательных ферментов приводит к гибели клеток культуры ткани. Развива- ется цитопатический эффект, который выражается в дезинтегра- ции монослоя, зернистой и вакуольной дистрофии клеток и ка- риопикнозе. Процесс завершается гибелью всего монослоя. При действии сублетальной дозы УФ-облучения (40—45 с) гибель или выживание клеток обнаруживается не сразу, а в от- даленные от облучения сроки. Прежде чем погибнуть, клетки успевают несколько раз разделиться, затем длительное время не делятся и, наконец, погибают [Самойлова, 1967]. Цитопатиче- ский эффект в данном случае выражается в дискомплексации клеточного пласта, наличии пикнотических изменений и дегене- рированных клеток. Исследования сопровождались несколькими контролями. 1. Контроль на наличие «зеркального» цитопатического эф- фекта при оптимальных условиях: концентрация засеваемой суспензии для образования монослоя-индуктора и монослоя- детектора равнялась 80 тыс. клеток в 1 мл питательной среды. 2. Контроль на выявление спонтанной дегенерации в клеточ- ных культурах; незараженные клеточные культуры с разрежен- ным и плотным монослоем монтировали попарно и помещали в термостат вместе с опытными, через 48 ч стекла-подложки ок- рашивали и просматривали на наличие неспецифической спонтан- ной дегенерации. 3. Кроме того, проводился контроль условий опыта, когда вместо кварцевой подложки использовали простое стекло. Наличие «зеркального» цитопатического эффекта определяли ио отношению числа погибших клеток к числу всех клеток и по ,69