Сверхслабые излучения в межклеточных взаимодействиях, 1981

единиц, из которых образуются микротрубочки веретена — струк- туры, обеспечивающие расхождение хромосом и останавливающие митоз на стадии перехода от метафазы к анафазе. После отмывания клеток от колцемида и при использовании его в оптимальных концентрациях не наблюдается изменений в строении митотиче- ского аппарата клеток. В литературе имеются данные о морфологи- ческих изменениях клеток, обработанных колцемидом [Iioltzer, 1975], по использованию ингибитора в опытах на различных куль- турах ткани в зависимости от концентрации и времени действия ингибитора [Lalley, 1974]. Показано, что колцемид не препятству- ет переходу клеток от взвешенного в среде состояния к прочному прикреплению к субстрату [Ivanova, 1976]. Опыты проводили на культуре клеток Hep-2 (перевиваемая линия злокачественной эпителиальной ткани, полученная из рако- вой опухоли гортани человека) и RH (перевиваемая линия добро- качественной эпителиальной ткани, полученная из почки челове- ка). Клетки выращивали по общепринятой методике. Плотность посева составляла 80 тыс./мл. В опытах использовали 24-часовую культуру. Конечная концентрация колцемида равня- лась 0,02 мкг/мл. Контролем служила культура, инкубированная в одинаковых условиях, но без добавления колцемида, лишь со сменой ростовой среды, параллельно с опытными культурами. Ис- следования проводили следующим образом. На монослой, выра- щенный на кварцевых стеклах в камерах, наносился колцемид — 0,02 мкг/мл одновременно с заменой ростовой среды на среду 199 без бычьей сыворотки. Дальнейшее культивирование клеток про- исходило в соответствии с ранее использованной методикой поста- новки опытов на кварцевых стеклах (получение «зеркального» ЦПЭ). Через сутки камеры снимали, стекла фиксировали метано- лом 15 мин и окрашивали гематоксилин-эозином. Результаты об- рабатывали по методике, предложенной С. Б. Стефановым (1974а, б). Морфологическую обработку препаратов проводили с помощью морфометрической сетки. Сетка состоит из тонких волокон, натя- нутых на кольцо, Которое вкладывается в окуляр микроскопа, на плоскость его диафрагмы. Она состоит из 16 квадратов одинаковой величины, образующих большой квадрат или полное рабочее поле сетки. Измеряющими элементами сетки являются узлы, образуе- мые перекрестками нитей сети в пределах рабочего поля. Измеря- емые объекты характеризуются тремя величинами: К — количест- во объектов на площади сетки; Р — число узлов сетки, попавших в объекты данного класса; Т — число пересечений контуров объ- ектов данного класса с линиями сетки. Если фигуры рассеяны строго случайно по препарату или его части, выделенной объектив- ными границами, то эти величины связаны с характеристиками препарата прямой пропорциональностью: К со К (среднему коли- честву объектов на площади), Р со S (средней площади фигур на 52